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Die Burg südlich von Heidelberg(,) bei Wiesloch(,) ist eine der ...

südlich von Heidelberg = Präpositionalattribut (ist für die Aussage konstitutiv und darf daher nicht mit Kommata als zusätzlicher Gedanke gekennzeichnet werden)

bei Wiesloch = Präpositionalattribut (mit Kommata als Einschub markiert; diese sind optional)

Beste Grüße
Vollprofi

PS: Ich würde die beiden Kommata setzen, weil man sonst denken könnte, es sei von einem Heidelberg bei Wiesloch die Rede. Heidelberg ist jedoch die größere Ortschaft.